狮子艾力 ( 本·斯蒂勒配音 )：以前是万兽之王，现在誓要超过猫王！
万兽之王狮子艾力，天性乐观，常为动物制造笑料，它最爱在动物园听观众的拍掌声；其乐天知命的个性恰恰与性格抑郁的长颈鹿相反，二人相处最有火花，可是一到马达加斯加，它杀戮的天性逐渐浮现，竟然要吃掉好友！令它与朋友的友情大受考验。
斑马马提 ( 克里斯·罗克配音 )：不管黑马白马，最要紧是出去闯荡一番！
斑马马提最有身份危机，是马是驴自己都搞不清，加上刚满十岁，步入中年危机(斑马平均寿命为二十岁)。双重危机＋不甘平淡的个性，令它决心往外见识，怎知它过度活跃的性格累及各位好友。
长颈鹿迈文 ( 戴维·施维默配音 )：开心自己找，哪怕要复诊！
长颈鹿迈文则患有少许抑郁症，带点神经质；它觉得自己有病，整天预约不同兽医，惹上一身城市病。
河马歌莉亚 ( 杰达·平凯特·史密斯配音 ) ：1吨重的万人迷，靓到压死人！
河马歌莉亚是片中唯一的雌性动物，细心又体贴，经常调停狮子同斑马这对活宝贝儿的争执。天性爱美的它，自认靓爆镜，身材“一”流，兼具潮流触角，衣着有品味，是动物中的女神，惹人羡慕。
古惑仔四企鹅
梦工场作品以意念创新、反传统、老幼咸宜见称，《怪物史莱克》、《鲨鱼故事》、《小鸡快跑》、《蚁哥正传》等纷纷成为现代经典。导演埃里克·达尼尔在完成《蚁哥正传》之后，本来正筹划一出名为《Rockumenatry》的动画，以4只企鹅为主角，反转披头士经典《一夜狂欢》(A Hard Day’s Night)。康拉德·弗农亦有参与此片的前期工作。可惜，因未能解决音乐版权的问题，这部企鹅电影被迫搁置。
结果，达尼尔和麦桂夫却一起合导了《马达加斯加》这个故事，而他们亦坚持影片“一行4个主角”的结构，虽然是狮子＋斑马＋长颈鹿＋河马！同时，他们锲而不舍地安排了4只企鹅登场，一心要逃出动物园找它们的新天地，还诱发了马提到非洲探险的好奇，4只企鹅可说是令它们由动物园巨星变成森林流浪者的幕后黑手；4 只企鹅的配音都是由梦工场动画幕后人员配音，其中导演麦桂夫更亲自配音企鹅首领Skipper！
狐猴一族
自称为狐猴之王的朱利安13世，最喜欢夜夜笙歌；而且经常冒出坏点子。它的左右手叫莫里斯，短小精干型，虽然喜欢跟朱利安斗气，但它们组成最佳拍档。另一只最可爱的小狐猴叫阿莫，圆头细鼻大眼睛，深得众动物的宠爱。
