李时珍-林文龙饰
时珍生于明朝正德13年(公元1518年)，祖父与父亲俱是蕲州濒湖医生。时珍生性是个药痴，对科举毫无兴趣，然而父亲一再施压，他才不得不答应赴考。
备考期间，时珍邂逅假扮‘药仙’赠医施药的冬青，时珍欣赏她的侠骨柔情与药理
知识，两人互相仰慕。
时珍因揭发考官因奸不遂；及朝廷权贵严嵩之子严世潘贿赂舞弊的丑闻，从而得罪考官，把他赶出考场，导致忧愤成疾，大病一场，幸被冬青所救。但时珍在昏迷中，却误会她是跟他有婚约的慕榕。
时珍由慕榕运送回乡后，从兄长果珍口中惊闻冬青已答应兄长的提亲，登时晴天霹雳，又因兄弟情深，时珍不惜让爱。
未几，慕榕患上怪疾，时珍为求秘方，往拜奇医小地藏为师。他一面学师，一面在民间行医。瘟疫期间，他发挥人道精神及精湛医术，成为抗疫英雄。
与此同时，时珍发现古代医书谬误颇多，令人无从分辨，引发他立志重修本草的宏愿。惜时珍触怒权贵严嵩，最终，他为保《本草纲目》手稿，展开了逃亡生涯。
吴慕榕-李诗韵饰
慕榕出身贵族，自幼父母双亡，寄居舅父荆王家中。她自小体弱多病，造成多愁善感性格。时珍十四岁中秀才时，慕榕已仰慕其才华，当年父母将自己许配给时珍，慕榕欣喜不已，决志非君不嫁。后来父母去世后，荆王嫌弃时珍三代行医、地位低微，加上他三次赴考落第，荆王决要退婚，慕榕伤心致极，不嫁此君，情愿削发为妮。这事感动了时珍，答应娶她，慕榕终偿心愿，嫁得时珍为妻。
慕榕嫁入李家后，洗尽铅华，重新学习简朴生活，从中悟出一套‘草本美容法’。
后来，冬青在京城开办药膳店，慕榕本着帮人之心，以自己过往在荆王府尝过之珍馐百味的经验，结合冬青对草药的认识，一起研究出多款美味而药用价值高的药膳，两人渐渐成为好姊妹。
及后，慕榕得悉时珍与冬青有一段情缘，忧郁成疾，时珍以药治之，冬青以药膳为她调理身体，却引来慕榕的妒恨爆发，三人关系僵住。
在时珍修订《本草纲目》期间，慕榕利用自己的绘画天份，替丈夫加上草药附图近千幅，所需毅力不亚于写书。时珍的最终成就，包含了她的爱和心血在内。
冬青-叶璇饰
冬青自小无父无母，被怪医小地藏收养女，并教她医术。冬青‘药仙’的身份，无意中被时珍拆穿，初时，她嬲恼时珍好管闲事，后来，对时珍的医术超凡及对医学的热诚，心感佩服，两人互生情愫。可惜阴差阳错下，时珍误把她当慕榕，救了自己一命，冬青亦把果珍误作时珍前来提亲。冬青恼恨时珍为了对兄长让爱，不向她问个究竟，便已另娶他人，骂时珍是懦夫，愤然离开伤心之地。后来，冬青重遇时珍，终释怀助时珍拜小地藏为师。
而她在时珍鼓励下，开设药膳食疗店，不能医人，也能保健，以达医者为善的心愿。
冬青的独立能干，令慕榕视为学习榜样，并自廌到药膳店帮手，两个女子共同研究厨艺，打响了药膳店招牌。冬青对慕榕不无感激，并成为好姊妹，这令冬青更处于矛盾之中。
庞宪-马国明饰
庞宪生于官宦之家，父亲是锦衣卫副都统。他自幼聪颖过人，是文武双全，曾经参军，后来进入太医院修读‘医官’(相等于现代的研究生)，是太医院的高材生，主修外伤骨科，因为做过军医，认为医病如打仗，喜欢把三十六计融汇医理当中。
在濒湖庞宪邂逅慕榕，对她一见钟情，决意于太医院毕业后，向慕榕提亲。太医院内，宪初看不起时珍，经常挑战他，后来终于被时珍高超的医药技术收服，甘拜时珍为师。宪拜师后，方知慕榕是时珍之妻，顿感晴天霹雳。
当时珍被严嵩所害，庞宪不惜冒着帮凶的罪名，追随时珍逃离太医院。庞宪一直追随时珍到他完成‘本草纲目’，在时珍逝世后，庞宪亦成为濒湖一带的名医。
严嵩-罗乐林饰
严嵩，进士出身，嘉靖年间被擢升为内阁大学士，后来更被委任首辅，位极人臣。严嵩能如此平步青云，只因善迎帝意，鼓吹方术，甚得嘉靖信任和重用。
他为求进一步巩固势力，勾结方士，利用太医院炼制仙丹，令皇帝沉溺丹药修道而不能自拔，岂料却遭初出茅庐的太医吏目李时珍批评丹药含有剧毒，多吃必损龙体而多番向皇上进谏。他不甘被破坏好事，而对时珍多番打压，在对方提出修改本草著作时，直斥其离经叛道，甚至不惜罗织罪名，欲毁其手稿，除之而后快。
