上海越剧院创建于1955年11月，其前身是由雪声剧团及云华剧团部分成员合并组成于1950年4月的华东越剧实验剧团，1951年3月，剧团编入华东戏曲研究院后，吸收了东山越艺社的成员，成为华东越剧实验剧团一团，1954年初，玉兰剧团归属华东戏曲研究院，定名为华东越剧实验剧团二团。1955年3月，华东戏曲研究院随着华东大行政区的撤销而停办，该院所属的两个越剧团和部分艺术干部遂建立了上海越剧院，院长袁雪芬。剧院下设两个演出实体一团(男女合演)、二团(女子越剧)、艺术室、研究室、舞美工场等。
多年来，剧院合作、改编、整理的古装戏、历史戏和现代戏300多台，《梁山伯与祝英台》、《西厢记》、《红楼梦》、《祥林嫂》等一批优秀作品成为越剧经典。
剧院荟萃了许多卓有成就的艺术家，拥有四十余位具有高资质的编、导、音、美、演及管理人才，其中有主要演员袁雪芬、范瑞娟、傅全香、徐玉兰、王文娟、张桂凤、徐天红、吴小楼、陆锦花、吕瑞英、金采风、周宝奎；编剧徐进、庄志；导演吴瑭、黄沙、钟泯、陈鹏；作曲顾振遐、陈捷、薛岩；舞美设计苏石风、顾大良、陈利华、黄子曦等。60年代后，剧院涌现出演员史济华、刘觉、张国华；编剧薛允璜、吴兆芬；导演胡越；作曲苏进邹；舞美设计杨楚之、孙志贤、朱柳庄等优秀人才。从70年代后期开始，剧院先后培养出赵志刚、钱惠丽、方亚芬、单仰萍、陈颖、章瑞虹、华怡青、王志萍、孙智君、许杰、张永梅、张承好、章海灵、郑国凤等一批表演新秀和李莉、孙虹江、朱立喜、谢同妙、张豫美、黄耘瑛等编、导、音、美人才。这一艺术群体驰骋于海内外舞台，摘取了金唱片奖、上海戏剧表演艺术白玉兰主角奖与配角奖、上海市优秀青年演员“十佳”等桂冠。
新时期，剧院产生了《忠魂曲》、《三月春潮》、《鲁迅在广州》、《汉文皇后》、《孔雀东南飞》、《西园记》、《凄凉辽宫月》、《血染深宫》、《莲花女传奇》、《魂断铜雀台》、《第十二夜》、《王子复仇记》、《玉簪记》、《女皇与公主》、《舞台姐妹》、《真假驸马》、《花中君子》、《状元打更》、《杨乃武》、《蝴蝶梦》、新版《红楼梦》、《早春二月》、《木棉红》、《救风尘》、《梅龙镇》、《被隔离的春天》、《珍珠塔》、《白衣卿相》、《家》等一大批好戏。有的剧目在文化部举办的全国调演中获奖，有的在上海市举办的戏剧节、艺术节中获奖。其中《血染深宫》(原名《深宫怨》)荣获文化部和中国剧协联合举办的第五届全国优秀剧本创作奖。
赵志刚任上海越剧院一团团长。
